分离方法说明及图例
A. 取 1ml新鲜抗凝血与E液1:1混合再与1ml的全血及组织稀释液(Cat#:2010C1119)混
匀置20℃-30℃下自然沉降20-30分钟。吸取浑浊的上清部分,底部红细胞(含大量中性
粒细胞)备用;
B. 将步骤A中所得的浑浊上清液体小心叠加在A液之液面上(上清液与A液的比例为1:1);
C. 以400g(约1500转/分)离心15分钟(半径15cm水平转子);
此时离心管中由上至下细胞分四层。*层;为稀释液(血浆)层。第二层;为环状
乳白色单个核细胞层。第三层;为混浊分离液层(此层液体中含有一定量中性粒细胞)。
第四层;极少量红细胞层(含一定量中性粒细胞)。
D. 将步骤A及步骤C中所得红细胞层用红细胞裂解液裂解并去除红细胞获得大量中性粒细
胞(详细方法请参看“二、红细胞裂解液使用说明”)。
E. 收集步骤C中所得第三层混浊分离液及步骤D中所得大量中性粒细胞放入含细胞洗涤液
(Cat#:2010X1118)4-5ml的试管中,充分混匀后,以500g(约1800转/分)离心20分钟,
弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需中性粒细胞。