骨髓中性粒细胞分离液试剂盒系列使用说明

1. 适用于各种动物骨髓本系列产品检索：

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备注：本公司销售的所有产品仅用于生化科研试验

2. 使用方法说明及图例

方法‣：

A. 取 1ml骨髓细胞悬液（制备方法详见‚九、骨髓细胞的采集方法‛）与E液按1：1比例混

合再与1份全血及组织稀释液混匀置20‡-30‡下自然沉降20-30分钟。吸取浑浊的上

部分，底部红细胞（含大量中性粒细胞）备用；

B． 将步骤A中所得的浑浊上清液体小心叠加在A液之液面上（上清液与A液的比例为1：1）； C． 以400g（约1500转/分）离心15分钟（半径15cm水平转子）；

此时离心管中由上至下细胞分四层。*层;为稀释液（血浆）层。第二层；为环状

乳白色单个核细胞层。第三层；为混浊分离液层（此层液体中含有一定量中性粒细胞）。

第四层；极少量红细胞层（含一定量中性粒细胞）。

D．将步骤A及步骤C中所得红细胞层用红细胞裂解液裂解并去除红细胞获得大量中性粒细胞

（详细方法请参看‚十一、红细胞裂解液使用说明‛）。

E． 收集步骤 C 中所得第三层混浊分离液及步骤 D 中所得大量中性粒细胞放入含细胞洗涤 液（Cat#：2010X1118）4-5ml 的试管中，充分混匀后，以 500g（约 1800 转/分）离心

20 分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤 2 次即得所需中性粒细胞。