牛抗菌肽共有13种，主要包括[5-6]牛β-防御素上皮抗菌肽、舌抗菌肽、肠上皮细胞抗菌肽，即肠肽素及牛肽聚糖识别蛋白）　　Diamond G等[7]从牛气管黏膜分离得到TAP，它是从哺乳动物上皮细胞分离纯化得到的*个抗菌肽，TAP的发现为其他的哺乳动物上皮细胞抗菌肽的发现奠定了坚实的基础。Tarver A P等[8]从牛小肠分离纯化得到牛肠肽素，其方法为采集牛小肠，液氮冻存，－70 ℃保存备用。

    粗提制备：剪碎，研磨，匀浆，用100 mL/L乙酸过夜搅拌浸提，过滤，液体用1 mol/L硫酸铵沉淀，离心，上清液浓缩即得粗提。纯化采用3步色谱技术，*步凝胶过滤色谱，生物凝胶P-30，排阻极限40 ku），2. 0 cm×30 cm 的柱子，用50 mmol/L的乙酸铵（pH 4.1）平衡、2.5 mL/min流速洗脱，收集、冷冻干燥并做抑菌试验。

     有活性部分进行阳离子交换色谱，用330 g/L KH2PO4溶液平衡，0 mol/L～1 mol/L的NaCl线性梯度洗脱，收集冷冻干燥。将有抗菌活性的部分进行第三步分离纯化，反相高压液相色谱，0.46 cm×22 cm C18反相柱，平衡1 mL/L三氟乙酸（TFA）水溶液，洗脱1 g/L TFA/乙腈，乙腈梯度0 mL/L～850 mL/L，洗脱速度1 mL/min，收集进行活性检测、分子量鉴定及序列测定。　　
    
     Aono S等[9]从牛乳腺上皮细胞克隆到一种新的牛β-防御素，并进行真核细胞表达。重组表达蛋白用CM Macro-Prep树脂进行纯化，纯化抗菌肽进行质谱分析，氨基酸测序。BPGRPs的纯化则先将粗提产物采用10 cm× 25 cm C18 catridge进行浓缩，再用RP-HPLC进行纯化，平衡1 mL/L TFA水溶液，洗脱1 mL/L TFA/乙腈，乙腈梯度0 mL/L～420 mL/L[10]。

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