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琼脂糖凝胶4B/Sepharose4B(379元/100ml)

更新时间:2011-06-09      点击:2152

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货号:oty-1250

规格:100ml

价格:379

产地:中国

英文名称:Sepharose 4B
CAS
号:9012-36-6
Agarose
4%
Optimal MW Separation range(globular proteins)
70×10∧320×10∧6
Bead size range
45165um
Recommend linear flow rate
11.5cm/h
pH stability
long term and working,short term 49
Chemical stability
Stable to all solutions commonly used in gel.filtration including 8 M urea and 6 M guanidine hydrochloride
Physical stability
Negligible volume variation due to changes in pH or ionic strength
性状:乳白色液体
用途:适合于分离蛋白及多糖、肽类分子量的测定

 

琼脂糖凝胶4B产品说明书

琼脂糖凝胶4B是用4%浓度琼脂糖制备成的球型颗粒,作为凝胶层析介质使用。

1. 外观

本品为乳白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

2. 理化指标

项       目

指       标

基质

4%琼脂糖凝胶

排阻极限

60000~20×106 (球蛋白

形状

球型

粒径

45~165 μm

zui高流速

70-140 cm/h*

耐压

0.03 MPa

耐热

pH7水中4524h

pH适用范围

4~9 (长时间), 3~11短时间,在位清洗

化学稳定性

可耐8mol/L尿素、6mol/L盐酸胍

 *检测条件: 层析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流动相为0.1mol/LNaCl

3包装

产品以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签,注明“品名、体积、颗粒大小、” 等内容。

4贮存

产品应密封贮存在4~25℃(保存溶液为20% 乙醇),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。

用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。

5注意事项

本品应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中

6.运输

运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。

7.保质期

5年。

8.应用

本产品为传统的琼脂糖介质,非特异性吸附低,回收率高,可多次重复使用等特点,用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。下面简要介绍介质的使用过程。

8.装柱

凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高,为了保证分离效果,一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶,或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。

以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子,可在柱床稳定后将柱床压紧,接好管路。

⑴让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。

 ⑵选择一根一定直径的柱子,长约30~60cm,根据柱子大小取所需量的凝胶(约为柱床体积的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用缓冲液(按凝胶:缓冲液=31的比例)配成匀浆。匀浆作脱气处理。不要剧烈搅动,以免搅坏微球。

⑶将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。

⑷  用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。

 打开蠕动泵,让缓冲液缓慢流过,使柱床稳定。

用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平,上好柱头。

8.2平衡

让缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。

8.3上样

⑴样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理,再上样。

⑵介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。

⑶上样体积约为柱体积的1~2%,越小分离越好。

8.4洗脱

用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。

8.5再生

一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。

8.6注意:在装柱、使用和保存柱子的时候,始终要避免柱子流干气泡进入。

 

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