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备注:本公司销售的所有产品仅用于生化科研试验
各种动物或人外周血造血干细胞和骨髓间充质干细胞分离液操作说明和使用及保存中的注意事项:
本品为带有乳光或微乳光的灭菌水溶液。主要成分是Ficoll 400 与泛影酸葡甲胺。适用于从组织匀浆中(胎牛血清或人血清悬起的匀浆细胞 1X107/ml)分离所需细胞,在医疗和医学生物学研究中广泛应用。
其他人及动物多种比重细胞分离液。注:因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同,所以用户在定制分离液时应提供所需分离液的比重、动物的种属及被分离细胞的名称。
使用方法:
1,例:取1ml肝素抗凝血与全血及组织匀浆稀释液(或胎牛血清或人血清悬起匀浆的细胞 1X108/ml)1:1混合再与1ml的干细胞重悬液(产品编号:TBD2012SCB)混匀置20度下自然沉降20-30分钟。吸取浑浊的上清部分,弃去底部红细胞备用。(使用本干细胞重悬液可zui终可获得全血中约2%干细胞,若省去重悬步骤则只可获得小于2%的干细胞。)
2,用吸取浑浊的上清部分液体小心叠加在本分离液之液面上(比例为1:1),20度400g/分钟,离心20分钟(水平转子),此时离心管中由上至下细胞分四层。
*层:为血浆或组织匀浆液层。
第二层:为环状乳白色含所需干细胞。
第三层:为透明分离液层。
第四层;为极少红细胞层,收集第二层细胞放入含细胞洗涤液(Cat#:2010X1118)4-5毫升的试管中,充分混匀后,以1500-2000转/分离心10-30分钟。沉淀经反复洗2次即得所需干细胞。(此方法效果较好,推荐使用)
分离图例:
注意事项
1. 启封后应置4℃保存避免微生物的污染。
2. 细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液温度升至室温时,摇匀后使用。
3. 整个分离过程中,温度应控制在18-28℃且在无菌环境下,避免微生物的污染,否则会影响分离质量。
应用
-从动物组织中分离所需细胞
特点
-密度变化率依照Ficoll 400,泛影酸和氢氧化钠.
-*分离溶液的密度为参照具体产品的标签
-生理学参数
-在低粘度时高密度
-无菌-即用型-溶液
产品质控
溶液 注射用水
pH 7.0-7.5
渗透压 280-340mOsmol/kg
内毒素 <5EU/ml
无菌 已检测
保存期限 2年
注意
TBD实验室的细胞分离培养基是敏光型的。这种培养基在运输和贮藏过程中应避光保温。由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索*的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。组织,血液,细胞要求新鲜,避免冷冻和冷藏。
贮藏
18-25℃避光保存。启封后置4℃保存。本品为真空包装,未启封前置于10℃以下易出现白色结晶,影响分离效果。
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