白细胞分离液试剂盒说明书

各种动物外周血和脏器组织白细胞分离试剂盒操作说明：

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试剂盒内容：

全血及组织匀浆稀释液100ml

细胞洗涤液100ml

试剂A 100ml

试剂E 100ml

说明书1份

操作方法：

A．取1ml新鲜抗凝血或组织匀浆单细胞悬液（细胞浓度为2×108-1×109个/ml，具体制备方法参照“组织单细胞悬液的制备”）与全血及组织匀浆稀释液（Cat#：2010C1119）1：1混合再与1ml的E液混匀置20℃-25℃下自然沉降30分钟。吸取浑浊的上清部分，弃去底部红细胞备用；

B．将步骤A中所得的浑浊上清液体小心叠加在A液之液面上（上清液与A液的比例为1：1）；

C．以400g（约1500转/分）离心15分钟（半径15cm水平转子）；

此时离心管中由上至下细胞分四层。*层：为血浆层。第二层：为环状乳白色单个核细胞。第三层：为混浊分离液层（此层液体中含有大量白细胞）。第四层：极少量红细胞层（如无红细胞层分离效果会更好），收集第二，三层混浊分离液及极少量红细胞层（如无红细胞层分离效果会更好）放入含细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）4-5ml的试管中，充分混匀后，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需白细胞。

注意

TBD 实验室的细胞分离培养基是敏光型的。这种培养基在运输和贮藏过程中应避光保温。由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以调节离心转数，调节离心的时间，摸索*的分离条件（具体分离条件各实验室自定）。组织，血液，细胞要求新鲜，避免冷冻和冷藏。

贮藏

18-25℃避光保存。启封后置4℃保存。本品为真空包装，未启封前置于10℃以下易出现白色结晶，影响分离效果。

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