单个核细胞分离液系列

1. 适用于各种动物血液及组织本系列产品检索：

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2. 使用方法说明及图例

2.1血液样本分离液使用说明及图例

A. 小量分离-使用 1-2ml 新鲜抗凝血（分离图例见图例 1）：

a.取新鲜抗凝血1-2ml，与全血及组织稀释液（Cat#：2010C1119）1:1混匀；

b.小心加于与混合液等体积的细胞分离液之液面上；

c.以400g（约1500转/分）离心15分钟（半径15cm水平转子）；

此时离心管中由上至下细胞分为四层。*层；为血浆层。第二层；为环状乳白色单

个核细胞层。第三层；为透明分离液层。第四层；为红细胞层。收集第二层细胞放入含4-5ml 细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）的试管中，充分混匀后，以500g（约1800转/分）离心20 分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需单个核细胞。

B. 中量分离-使用 5-10ml 新鲜抗凝血（分离图例见图例 1）：

a.取新鲜抗凝血5-10ml，与全血及组织稀释液（Cat#：2010C1119）1:1混匀；

b.将混合液小心叠加于细胞分离液之液面上（混合液：分离液=2：1）；

c. 以 500g（约 1800 转/分）离心 15 分钟（半径 15cm 水平转子）；

此时离心管中由上至下细胞分为四层。*层；为血浆层。第二层；为环状乳白色单

个核细胞层。第三层；为透明分离液层。第四层；为红细胞层。收集第二层细胞放入含10ml 细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）的试管中，充分混匀后，以500g（约1800转/分）离心20 分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需单个核细胞。

C. 大量分离 I-使用 20ml 新鲜抗凝血（分离图例见图例 2）：

a.取新鲜抗凝血20ml以200g（约1100转/分）离心20分钟弃去血浆；

b.向弃去血浆的血细胞中加入全血及组织稀释液（Cat#：2010C1119）12ml小心混匀；

c.将混合液小心叠加于细胞分离液之液面上（混合液：分离液=2：1）；

d. 以 600g（约 2000 转/分）离心 15 分钟（半径 15cm 水平转子）；

此时离心管中由上至下细胞分为四层。*层；为血浆层。第二层；为环状乳白色单个

核细胞层。第三层；为透明分离液层。第四层；为红细胞层。收集第二层细胞放入含 20ml 细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）的试管中，充分混匀后，以500g（约1800转/分）离心20 分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需单个核细胞。

D. 大量分离 II-使用 50ml 新鲜抗凝血（分离图例见图例 3）：

a.取新鲜抗凝血50ml与HES-TBD550液1:1混合后再与1份注射用生理盐水混匀20‡-30

‡静置20-30分钟。吸取混浊的上清液备用，弃去底部红细胞。

b.将步骤1中留取的上清液以200g（约1100转/分）离心20分钟弃去上清保留沉淀细

胞；

c.向沉淀的细胞中加入全血及组织稀释液（Cat#：2010C1119）20ml小心混匀；

d.将混合液小心叠加于细胞分离液之液面上（混合液：分离液=2：1）；

e. 以 600g（约 2000 转/分）离心 15 分钟（半径 15cm 水平转子）；

此时离心管中由上至下细胞分为四层。*层；为血浆层。第二层；为环状乳白色单个

核细胞层。第三层；为透明分离液层。第四层；为红细胞层。收集第二层细胞放入含 20ml

细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）的试管中，充分混匀后，以500g（约1800转/分）离心20

分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需单个核细胞。

注：提取率约为80%。