台盼蓝之细胞染色

台盼蓝（Trypan Blue，也称Direct blue 14）：一种死细胞染色用色素

化学名：
3,3'-bis（5-amino-4-hydroxy-2,7-naphthalenedisulfonic acid）, tetrasodium salt3,3’--双（5-氨基-4-羟基-2,7-萘二磺酸），四钠盐

分子式：C34H24N6Na4O14S4
分子量：960.81
CAS Number： 72-57-1
外观：黑褐色结晶粉末
摩尔吸光度：>69,000（在606nm附近）

染色原理：
细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。这被称为染料排除测试（dye exclusion），Erythrosin B（红色）、negrosine、eosin Y、AO和EB也用于此目的。通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞，并可使用细胞计数器进行计数。

溶于水，可以配制成10mg/ml的水溶液，水溶液呈深蓝色。
台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况，用0.4%台盼蓝直接染色5-10分钟，在显微镜下观察即可。

应用于细胞凋亡：
如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。尽管在凋亡的早期到中期检测是很困难的，此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。

储存条件：常温保存

注意事项：
1. 台盼蓝对人体有毒
2. 台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数。
3. 台盼蓝染色法对于悬浮细胞来说，还比较方便，对贴壁细胞来说，较为繁琐。因为要消化，有时，96孔板不一定能消化干净。而且，该法是测定细胞浓度的方法，与细胞悬液的体积有关，加入的胰蛋白酶或1640要计入终体积。可以说，该法相对准确，可能有一些人为因素的干扰。