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　　人类免疫缺陷病毒（HIV），导致获得性免疫缺陷综合征（AIDS）即艾滋病的产生，zui早于1984在美国明确发现。到2002年6月底已有6000万人感染了HIV，其中2000万人已被艾滋病夺去生命，艾滋病正已每天1.4万人受感染的速度扩大流行，目前该病尚无法治愈，也无有效疫苗。
　　
　　截止到2003底我国HIV感染者已近84万，进入了快速增长期，据有关专家估计，如不采取积极有效的控制措施，到2010年我国HIV感染者将达1000万，形势十分严峻。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分，只有发现传染源才能更有效地控制艾滋病传播。
　　
　　通过检测HIV的特异性抗体、抗原、核酸或病毒分离培养可确立HIV感染，WHO和我国卫生部推荐使用的HIV感染诊断方法是血清学抗体检测。
　　
　　一、HIV检测的特殊性HIV检测不同于其他病原微生物检测，要求十分严格，任何错误的诊断，包括假阳性或假阴性，都会对被检者产生十分重要的影响。因此，HIV检测必须严格按照国家制定的《艾滋病检测工作管理办法》和《艾滋病检测技术规范》（以下简称《规范》）进行，检测的实验室须经当地卫生行政部门审批合格，从事艾滋病检测工作的技术人员须接受专门的技术培训，并获合格证书，诊断试剂应选择高敏感和高特异的，筛查呈阳性反应的需用特异性更强的方法（如：免疫印迹试验）进行确认，整个实验过程应有严格的质量保证体系。
　　
　　二、HIV抗体检测目前国外用于HIV抗体筛查的方法很多，根据检测原理不同分为酶联免疫吸附法、凝集法和层析法，可对血液、唾液和尿液标本进行常规或快速检测。在实际工作中常用的有酶联免疫吸附试验（ELISA）、明胶凝集试验和各种快速诊断试剂。电泳试剂
　　
　　自1985年*代ELISA试剂问世以来，随着医学技术的飞速发展，包被抗原已从一代的全病毒裂解物发展为目前以基因重组和多肽抗原包被和标记、有着良好敏感性和特异性的三代双抗原夹心试剂，检测亚型包括HIV-1、HIV-2和HIV-1型的O亚型，窗口期由10周缩短至3-4周。为避免窗口期传染，荷兰、法国等国已研制出第四代以重组的多肽抗原和抗P24抗体包被的双抗原夹心法试剂盒，可同时检测抗原抗体，使窗口期缩短了2-3周，但其临床价值有待评估。
　　
　　按《规范》要求，我国采供血机构进行血液筛查和各医疗卫生机构常规筛查检测宜采用ELISA法，自采自供血的单位必须进行HIV抗体检测，在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区或大医院急诊手术前可由经过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进行血液筛选。对用ELISA试剂或快速诊断试剂进行的筛查实验如呈阴性反应，即报告HIV抗体阴性；对呈阳性反应的标本，筛查实验室应用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测，如两种试剂复测均呈阴性反应，染料则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。
　　
　　筛查试剂必须是HIV-1/2混合型、经国家药品监督管理局（SDA）注册批准、批批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。HIV抗体筛查呈阳性反应的标本由于存在假阳性的可能，必须做确认试验。上有3种确认试验方法，包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验，目前以免疫印迹试验zui为常用。确认试剂必须经SDA注册批准。免疫印迹试剂有HIV-1/2混合型和单一型，按《规范》要求，一般先用HIV-1/2混合型试剂进行检测，根据《规范》中判定免疫印迹试验结果的基本原则并参照所用试剂说明书综合判定，无HIV抗体特异带出现的报告HIV抗体阴性；出现HIV抗体特异带，符合HIV-1抗体阳性判定标准，则报告HIV-1抗体阳性。如出现HIV-2型的特异性条带，需用HIV-2型免疫印迹试剂再做单一的HIV-2型抗体确认试验，呈阴性反应，报告HIV-2抗体阴性；呈阳性反应的则报告HIV-2抗体血清学阳性，如需鉴别应进行核酸序列分析。如果出现HIV抗体特异带，但带型不足以判定为阳性，则判为HIV抗体不确定。
　　
　　对HIV抗体不确定者应按《规范》要求进行随访，必要时可做HIV-1P24抗原或核酸测定，但检测结果只能作为辅助诊断依据，确认报告要依据血清学随访结果。由于目前唾液检测试剂的敏感性和尿液检测试剂的特异性明显低于血液检测试剂，故我国SDA已注册批准的HIV抗体筛查和确认试剂只能用于血液标本检测。
　　
　　三、HIV抗体检测的质量控制在所有实验中必须包含有内部对照质控血清和外部对照质控血清。内部对照质控血清指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质量控制的基础，每次检测必须使用内部对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。外部对照质控血清是由实验室设置的弱阳性对照，一般以该试剂盒临界值（Cutoff）的2-3倍为宜。该血清可到专门单位购买，也可由实验室自己制备。
　　
　　制备方法是：收集HIV抗体阳性和阴性血清，56℃30min灭活，3000rpm离心15min，弱阳性对照可以用HIV抗体阴性的健康人血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清、或用试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清混合并标定后得到，一般按一年使用量配制，用0.2μm滤膜过滤除菌，按一周实验用量分装、分类、标记并封口，-20℃冻存。该血清不可反复冻融，融化后应存放2-8℃，一周内使用。原则上每次实验必须使用外部对照质控血清，以便监控本次实验的重复性和稳定性，同时了解各批试剂盒的批间差异，绘制质量控制图。
　　
　　四、HIV-1P24抗原检测HIV感染人体后有一段窗口期，在这段时期病毒抗体不能被检出，但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒。故在窗口期检测抗原是早期辅助诊断和缩短窗口期的一种方法，在感染早期和发病期抗原检出率相对较高。HIV-1P24抗原检测还适用于：HIV-1阳性母亲所生婴儿的早期辅助鉴别诊断；第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应、但HIV-1抗体确认阴性者的辅助诊断；监测病程进展和抗病毒治疗效果。P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂，必须经过SDA批准注册。
　　
　　HIV-1P24抗原的阳性结果必须经过中和试验确认,该结果仅作为HIV感染的辅助诊断依据，不能据此确诊；HIV-1P24抗原检测阴性只表示在本试验中无反应，不能排除HIV感染。

     五、HIV核酸检测HIV核酸检测，通常是检测HIVRNA，以前只能定性检测血液中是否存在病毒核酸，而目前的技术可定量检测血液中病毒复制水平。HIV核酸定性检测可用于HIV感染的辅助诊断，如窗口期辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程等。通常使用PCR或RT-PCR技术，使用分子生物学实验室通用的扩增试剂，引物可来自文献或自行设计，应尽量覆盖所有或常见的毒株，也可使用复合引物。
　　
　　HIV核酸定量检测多用于监测HIV感染者的病程进展和抗病毒治疗效果，目前常用的测定方法有逆转录PCR实验（RT-PCR）、核酸序列扩增实验（NASBA）、分支DNA杂交实验（bDNA）等。在不同HIV定量检测方法的选择中，由于目前用于统一不同定量方法检测值的标准品尚未问世，因此不同定量方法结果之间还无法直接进行比较，建议同一病人治疗前后用同一方法进行HIV定量检测。
　　
　　值得注意的是，HIV核酸定性检测阴性，只可报告本次实验结果阴性，但不能排除HIV感染；HIV核酸检测阳性，可作为诊断HIV感染的辅助指标，不能单独用于HIV感染的诊断，报告定性检测结果时还应注明反应条件和所使用的引物序列。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果，注明使用的试验方法、样品种类和样品量，当测定结果小于zui低检测*，应注明zui低检测限水平，低于zui低检测限的结果不能排除HIV感染。biomiga分子生物试刘盒